土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性檢測試劑盒說明書

注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。貨號：DM-W-S-LAP

規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體30mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存；臨用前加入3mL丙酮溶解。

產(chǎn)品說明：

微量法

S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。

S-LAP分解L-亮氨酸對硝基苯胺生成對硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。

自備實驗用品及儀器：

天平、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目篩（或更?。?/span>

1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，波長調(diào)至405nm，蒸餾水調(diào)零。

2、加樣表：

三、酶活計算公式

1. 按微量比色皿計算： 

酶活性定義：每克土壤每分鐘生成1nmol 對硝基苯胺為一個酶活力單位。

S-LAP 活性（U/g）=△A÷(ε×d) ×109×V反總÷W÷T=0.507×△ A÷W 。

ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)：9.87×103 L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應(yīng)總體積，300µL=3×10-4 L；W：土樣質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，60min；109：單位換算系數(shù)，1mol=109nmol。

2. 按96孔板計算：

酶活性定義：每克土壤每分鐘氧化1nmol 對硝基苯胺為一個酶活力單位。

S-LAP 活性（U/g）=△A÷(ε×d) ×109×V反總÷W÷T=0.844×△ A÷W 。

ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)：9.87×103 L/mol/cm；d：96 孔板光徑，0.6cm；V 反總：反應(yīng)總體積，300µL=3×10-4 L；W：土樣質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，60min；109：單位換算系數(shù)，1mol=109nmol。